ⅠNasid wcleigicyflwyniad
Rhennir asid niwclëig yn asid deocsiriboniwclëig (DNA) ac asid riboniwcleig (RNA), ymhlith y rhain mae RNA wedi'i rannu'n RNA ribosomaidd (rRNA), RNA negesydd (mRNA) ac yn trosglwyddo RNA (tRNA) yn ôl ei swyddogaethau gwahanol.Mae DNA wedi'i ganoli'n bennaf yn y cnewyllyn, mitocondria a chlorofform, tra bod RNA yn cael ei ddosbarthu'n bennaf yn y cytoplasm.Fel sail faterol mynegiant genynnau, mae echdynnu asid niwclëig yn chwarae rhan hynod bwysig mewn ymchwil bioleg foleciwlaidd a diagnosis moleciwlaidd clinigol.Bydd crynodiad a phurdeb echdynnu asid niwclëig yn effeithio'n uniongyrchol ar y PCR dilynol, dilyniannu, adeiladu fector, treuliad ensymau ac arbrofion eraill.
Ⅱ Dull echdynnu a phuro asid niwcleig
① Dull echdynnu ffenol/clorofform
Mae echdynnu ffenol / clorofform yn ddull clasurol ar gyfer echdynnu DNA, sy'n defnyddio dau doddydd organig gwahanol yn bennaf i drin y samplau, gan doddi asid niwclëig sy'n seiliedig ar DNA yn y cyfnod dŵr, lipidau yn y cyfnod organig, a phroteinau rhwng y ddau gam.Mae gan y dull hwn fanteision cost isel, purdeb uchel ac effaith dda.Yr anfanteision yw gweithrediad cymhleth ac amser hir.
② dull Trizol
Mae dull Trizol yn ddull clasurol ar gyfer echdynnu RNA.Rhennir y dull Trizol yn gyfnod dyfrllyd a chyfnod organig ar ôl centrifugio â chlorofform, lle mae'r RNA yn cael ei ddiddymu yn y cyfnod dyfrllyd, trosglwyddir y cyfnod dyfrllyd i diwb EP newydd, ceir dyddodiad ar ôl ychwanegu isopropanol, ac yna puro ethanol.Mae'r dull hwn yn addas ar gyfer echdynnu RNA o feinweoedd anifeiliaid, celloedd a bacteria.
③ Dull puro colofn allgyrchol
Gall dull puro colofn Centrifuge arsugniad DNA yn benodol trwy ddeunyddiau arsugniad matrics silicon arbennig, tra gall RNA a phrotein basio'n esmwyth, ac yna defnyddio halen uchel PH isel i gyfuno asid niwclëig, halen isel uchel PH gwerth elution i wahanu a phuro asid niwclëig.Y manteision yw crynodiad puro uchel, sefydlogrwydd uchel, dim angen toddydd organig, a chost isel.Yr anfantais yw bod angen iddo fod yn centrifuged cam wrth gam, mwy o gamau gweithredu.
④ dull gleiniau magnetig
Y dull gleiniau magnetig yw rhannu'r sampl meinwe celloedd trwy'r lysate, rhyddhau'r asid niwclëig yn y sampl, ac yna mae'r moleciwlau asid niwclëig yn cael eu harsugno'n benodol ar wyneb y glain magnetig, tra bod amhureddau fel proteinau a siwgrau yn cael eu gadael i mewn. yr hylif.Trwy gamau hollti meinwe gell, rhwymo gleiniau magnetig ag asid niwclëig, golchi asid niwclëig, elution asid niwclëig, ac ati, mae asid niwclëig pur yn cael ei sicrhau o'r diwedd.Y manteision yw gweithrediad syml a defnydd amser byr, heb fod angen centrifugation cam.Mae ganddo ofynion technegol isel a gall wireddu gweithrediad awtomatig a màs.Mae'r cyfuniad penodol o glain magnetig ac asid niwclëig yn gwneud yr asid niwclëig wedi'i dynnu â chrynodiad a phurdeb uchel.Yr anfantais yw bod pris cyfredol y farchnad yn gymharol ddrud.
⑤ Dulliau eraill
Yn ogystal â'r pedwar dull uchod, mae cracio berwi, dull halen crynodedig, dull glanedydd anionig, dull ultrasonic a dull enzymatig, ac ati.
Ⅲ Math o echdynnu asid niwclëig
Mae gan Foregene blatfform PCR Uniongyrchol blaenllaw'r byd, platfform ynysu RNA dwy golofn (DNA-yn-unig + RNA yn unig).Mae'r prif gynnyrch yn cynnwys pecynnau ynysu DNA / RNA, cyfres PCR adweithyddion adweithyddion labordy moleciwlaidd Uniongyrchol.
① Cyfanswm echdynnu RNA
Mae cyfanswm samplau echdynnu RNA yn cynnwys gwaed, celloedd, meinweoedd anifeiliaid, planhigion, firysau, ac ati Gellir cael purdeb uchel a chrynodiad uchel o gyfanswm RNA trwy echdynnu RNA cyfanswm, y gellir ei ddefnyddio mewn RT-PCR, dadansoddi sglodion, cyfieithu in vitro, clonio moleciwlaidd, Dot Blot ac arbrofion eraill.
Foregene perthynolPecynnau Ynysu RNA
Pecyn Ynysu RNA Cyfanswm Anifeiliaid--Tynnu cyfanswm RNA purdeb uchel ac o ansawdd uchel yn gyflym ac yn effeithlon o wahanol feinweoedd anifeiliaid.
Pecyn Ynysu Cyfanswm Cell RNA--Gellir cael RNA pur iawn ac o ansawdd uchel o wahanol gelloedd diwylliedig mewn 11 munud.
Planhigion Pecyn Ynysu RNA Cyfanswm--Tynnwch gyfanswm RNA o ansawdd uchel yn gyflym o samplau planhigion gyda chynnwys polysacarid a polyphenol isel.
Pecyn ynysu RNA firaol--Ynysu a phuro RNA firaol yn gyflym o samplau fel plasma, serwm, hylifau corff di-gell a supernatants meithrin celloedd.
② Echdynnu DNA genomig
Mae samplau echdynnu DNA genomig yn cynnwys pridd, feces, gwaed, celloedd, meinweoedd anifeiliaid, planhigion, firysau, ac ati Gellir defnyddio echdynnu DNA genomig mewn treuliad ensymau, adeiladu llyfrgell DNA, PCR, paratoi gwrthgyrff, dadansoddiad hybridization blot Western, sglodion genyn, uchel dilyniannu trwybwn ac arbrofion eraill.
Foregene perthynolPecynnau Ynysu DNA
Pecyn Ynysu DNA Meinwe Anifeiliaid--Echdynnu a phuro DNA genomig yn gyflym o ffynonellau lluosog, megis meinweoedd anifeiliaid, celloedd, ac ati.
Pecyn Midi DNA gwaed (1-5ml)--Puro DNA genomig o ansawdd uchel yn gyflym o waed gwrthgeulo (1-5ml).
Pecyn Ynysu DNA Swab Buccal/Cerdyn FTA-- Puro DNA genomig o ansawdd uchel yn gyflym o samplau swab buccal / Cerdyn FTA.
Pecyn Ynysu DNA Planhigion--Puro'n gyflym a chael DNA genomig o ansawdd uchel o samplau planhigion (gan gynnwys polysacaridau a samplau planhigion polyphenol)
③ Echdynnu plasmid
Mae plasmid yn fath o DNA moleciwl bach crwn mewn celloedd, sy'n gludwr cyffredin ar gyfer ailgyfuno DNA.Y dull o echdynnu plasmid yw tynnu RNA, gwahanu plasmid o DNA genomig bacteriol, a thynnu protein ac amhureddau eraill i gael plasmid cymharol pur.
Pecyn Mini Plasmid Cyffredinol--Puro DNA plasmid o ansawdd uchel yn gyflym o facteria wedi'u trawsnewid ar gyfer arbrofion bioleg moleciwlaidd arferol fel trawsnewid a threulio ensymau
④ Mathau echdynnu eraill, echdynnu miRNA, ac ati.
Pecyn Ynysu miRNA anifeiliaid-- Tynnwch ddarnau RNA bach o 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA yn gyflym ac yn effeithlon o amrywiol feinweoedd a chelloedd anifeiliaid
Ⅳ Gofynion ar gyfer canlyniad echdynnu a phuro asid niwclëigs
① Er mwyn sicrhau cyfanrwydd strwythur sylfaenol asid niwclëig.
② Lleihau ymyrraeth proteinau, siwgrau, lipidau a macromoleciwlau eraill
③ Ni ddylai fod unrhyw doddydd organig na chrynodiad uchel o ïonau metel a all atal yr ensym mewn samplau asid niwclëig.
④ Dylid dileu RNA a halogiad asid niwclëig arall wrth echdynnu DNA, ac i'r gwrthwyneb.
Amser postio: Tachwedd-24-2022
